PCR 仪的工作原理基于 PCR 技术,主要包括三个步骤:变性、退火和延伸。
在变性阶段,PCR 仪将双链 DNA 加热至 95℃左右,使其双链分离成单链。这一步的目的是为下一步的退火做准备。
接下来是退火阶段,PCR 仪将温度降低到 50-65℃,使单链 DNA 与引物(一小段特定的 DNA 序列)结合。引物的设计是根据目标 DNA 序列来确定的,它们与目标 DNA 序列的两端互补,从而能够特异性地结合到目标 DNA 上。
最后是延伸阶段,PCR 仪将温度升高到 72℃左右,此时 DNA 聚合酶开始工作,以结合 的引物为起点,沿着单链 DNA 合成新的互补链。这样,就完成了一次 DNA 扩增的循环。
以上三个步骤会在 PCR 仪中不断重复,通常经过 20-40 个循环后,目标 DNA 片段会得到大量扩增。
PCR 仪通过精确控制温度变化,实现了 DNA 的高效扩增。其工作原理的核心是利用了 DNA 聚合酶的特性,在特定温度下进行变性、退火和延伸反应,从而实现特定 DNA 片段的快速扩增。